?Anti-ACA11是低豐度膜蛋白，反復(fù)凍融會對樣本和檢測結(jié)果造成明確的負面影響，核心影響按凍融次數(shù)遞增：?
?1~2次凍融?：僅10%~30%的靶標降解，對結(jié)果影響較小，一般仍可檢出信號，僅靈敏度略有下降；
?3次及以上凍融?：超過50%的ACA11發(fā)生降解，會直接導(dǎo)致信號大幅減弱，甚至出現(xiàn)假陰性；部分降解的蛋白片段還會引發(fā)非特異性結(jié)合，增加假陽性概率；
?長期反復(fù)凍融?：會導(dǎo)致蛋白整體變性聚集，樣本出現(xiàn)渾濁沉淀，內(nèi)參和靶標都無法檢出，樣本失效。
反復(fù)凍融還會導(dǎo)致每次實驗的靶標含量不一致，直接造成實驗重復(fù)性差，結(jié)果波動大，無法得到穩(wěn)定可靠的結(jié)論。
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